基于CRISPR—Cas9定向编辑CCL17和CCL22基因的研究(1)
基于CRISPR—Cas9定向编辑CCL17和CCL22基因的研究,引导RNA,趋化因子,基因编辑
[摘要]目的 针对人源的CCL17和CCL22基因进行CRISPR/Cas9-gRNA设计,并验证设计的sgRNA的有效敲除效率。方法 利用CRISPR网站提供的工具对CCL17和CCL22基因的靶向编辑位点进行筛选设计,然后构建CRISPR-Cas9-CCL17和CRISPR-Cas9-CCL22敲除质粒,并将构建好的质粒转入293 T细胞系,然后通过基因组PCR产物的T-A克隆测序方法分别验证设计的sgRNA敲除质粒的编辑效率。结果 成功构建针对于人源CCL17和CCL22基因的sgRNA敲除质粒,并有着良好的编辑效率,均达70%以上。结论 针对CCL17和CCL22基因设计的CRISPR敲除质粒对靶基因有着很好的编辑效果,为后续基于CCL17和CCL22的相关性研究奠定了基础。[关键词]CRISPR;引导RNA;趋化因子;基因编辑
[中图分类号] R319 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2018)4(c)-0004-05
Study on genome editing targeting CCL17 and CCL22 using CRISPR-Cas9 system
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School of Biosciences and Biopharmaceutics ......
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